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猪去氧胆酸的纯化工艺

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猪去氧胆酸的纯化工艺

发布日期:2019-01-06 作者: 点击:

猪去氧胆酸

泰安广鑫生物科技秒速快3为您介绍猪去氧胆酸的纯化工艺:

去氧胆酸具有降血脂、镇痉、祛痰等作用,为人工牛磺的重要成分;临床上可用于治疗高血症、气管炎以及由肝胆疾病引起的消化不良,对百日咳菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌亦有抑制作用。猪去氧胆酸钠还有杀灭、碎解阴道毛滴虫及杀精子作用。HDCA 主要从猪胆汁中提取, 其提取工艺分为皂化 (猪胆汁酸经强碱水解 ) 和精制 (脱色、 脱水、 浓缩、 干燥 ); 除含HDCA外, 还含有相当数量的其他胆汁酸, 如鹅去氧胆酸(约占 25% )和胆酸。研究HDCA(猪去氧胆酸)必须对其进行纯化。文献报道多为提取、制备HDCA的方法,有关精制、纯化方法报道很少。猪去氧胆酸(HDCA)纯化方法主要以乙酸乙酯重结晶为主。但乙酸乙酯在生产过程中易分解, 其分解程度严重影响产品的纯度。

为此, 特对 HDCA 的纯化方法及其主要杂质进行了研究。试验表明,HDCA在甲醇、乙醇以及乙酸中易溶,不溶于水和石油醚。利用不同溶剂溶解样品并结合TLC进行初步考察发现,极性较大的溶液能更多地溶解杂质,有利于纯化。因此,我们采用甲醇和水以及乙醇和水对HDCA进行重结晶,收率和纯度均较高;乙酸和水重结晶的收率相对较低但是纯度更高。所得HDCA衍生化后, 经HPLC测定其纯度(大于 92% ),方法简便, 纯度提高显著。同时,也对HDCA中主要杂质进行了研究。经柱层析分离纯化得到纯品,经氢、碳谱分析和文献对照,确定该杂质为胆酸。HDCA为从胆汁中提取的生物制剂,含有较多杂质, 实验所购HDCA的4批样品经TLC检测均含有杂质。HDCA的标识纯度与实际纯度差异较大(普遍在10%左右 )。

因此, 特对市售纯度较高的HDCA进行了纯化。猪去氧胆酸的纯化工艺法主要是去除胆酸中极性较大的杂质。而用乙酸乙酯重结晶则可以去除极性较小部分的杂质。在单一溶剂重结晶的过程中, 采用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇等效果均不理想; 而水和石油醚由于溶解度太小无法进行单一溶剂的重结晶。在HDCA的分离与纯化方法中, 我们曾经比较硅胶与氧化铝的柱层析,发现氧化铝 (酸性 )的吸附性较强, 因此, 采用硅胶进行分离。洗脱剂以氯仿-甲醇以及乙酸乙酯-石油醚较好。其中乙酸乙酯-石油醚系统适当调低极性, 效果较理想。通过试验建立了利用乙酸和水以及乙醇和水重结晶纯化 HDCA 的方法, 纯度提高显著。此方法实施简便, 适于工业化生产。利用柱层析法分离得到了HDCA纯品和猪去氧胆酸中的杂质, 经波谱法和文献对确定该杂质为胆酸。


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