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猪去氧胆酸提取工艺研究

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猪去氧胆酸提取工艺研究

发布日期:2018-01-08 作者: 点击:

猪去氧胆酸

猪去氧胆酸(a-hydroxycholic,HDCA)是从猪胆粉(为猪胆汁的干燥品)中提取的有效成分,具有降血脂、镇痉、祛痰作用,临床上用于高血脂症、气管炎以及由肝胆疾病引起的消化不良,对百日咳菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有抑制作用,其作为清开灵 注射剂中的有效成分,经临床观察对急性白血病的治疗有良好作用,体外实验证明其具有诱导细胞凋亡、抑止细胞的增殖分裂作用。猪去氧胆酸的提取工艺分为皂化、精制(脱色、脱水、浓缩、干燥)。迄今为止,尚未见猪去氧胆酸的提取工艺参数研究。作者首先对碱皂化工艺进行了实验研究,优选出最佳工艺条件,对优选的皂化工艺进行了验证;在前期皂化工艺的基础上,以加溶媒量、活性炭量、回流时间、回流次数等工艺条件为考察因素,对精制工艺进行正交实验优化,并对优选的精制工艺进行验证。1仪器与试剂CS-9000双波长薄层扫描仪、硅胶板G、猪去氧胆酸对照品、环己烷、醋酸乙脂、冰醋酸、氢氧化钠、盐酸、浓硫酸、无水乙醇等试剂均为分析纯。2

方法与结果

2。1 猪去氧胆酸含量的测定方法测定猪胆粉提取物中猪去氧胆酸的含量,依据参考文献采用双波长薄层扫描法。

2.1.1 色谱条件 依据有关胆汁酸类物质的薄层色谱条件报道,硅胶板G,展开剂为环己烷-醋酸乙脂-冰醋酸(4∶4∶0.7);显色剂为10%硫酸乙醇,110℃烘至斑点显色,用洁净玻璃板覆盖;扫描条件λS=375nm,λR= 650nm,SX=3,狭缝为1.2mm×1.2mm,双波长反射法锯齿扫描。 

2.1.2 样品溶液的制备 将经水解后的猪去氧胆酸粗品研成粉末,精密称取220mg,置25mL量瓶中,加适量醋酸乙脂,超声10min,用醋酸乙脂稀释至刻度。 

2。1。3 对照品溶液的制备 精密称取猪去氧胆酸对照品10。02mg至10mL量瓶中,用醋酸乙脂稀释至刻度,即得。

2。1。4 线性关系的考察 精密吸取对照品溶液0。5,1,2,3,4μL,分别点于同一薄层板上,以环己烷-醋酸乙脂-冰醋酸(4∶4∶0。7)为展开剂展开,取出晾干,浸于10%硫酸乙醇溶液中,立即取出,110℃烘至斑点显色,于λS=375nm,λR=650nm波长进行双波长扫描测定,见表1。以点样量为横坐标,斑点峰面积为纵坐标,进行线性回归处理,得回归方程Y=5463。66X+4880。97,r=0。998。猪去氧胆酸在0。5~4μg与峰面积呈良好的线性关系

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